甲基化特異性PCR（MSP）
【技術(shù)簡介】
（1）技術(shù)原理
甲基化特異性的PCR是一種靈敏度高且操作相對(duì)簡單的甲基化研究方法。重亞硫酸鹽處理DNA后，基因組DNA發(fā)生的由甲基化狀態(tài)決定的序列改變。隨后進(jìn)行引物特異性的PCR。該方法引物設(shè)計(jì)是關(guān)鍵。MSP中設(shè)計(jì)兩對(duì)引物，即一對(duì)結(jié)合處理后的甲基化DNA鏈（引物對(duì)M），另一對(duì)結(jié)合處理后的非甲基化DNA鏈（引物對(duì)U）。檢測(cè)MSP擴(kuò)增產(chǎn)物，如果用引物M能擴(kuò)增出片段，則說明檢測(cè)位點(diǎn)存在甲基化；若用引物U擴(kuò)增出片段，則說明被檢測(cè)的位點(diǎn)不存在甲基化。
（2）技術(shù)應(yīng)用
腫瘤的早期預(yù)測(cè)、分類分級(jí)、預(yù)后評(píng)估及多種疾病的分析；轉(zhuǎn)錄水平分析：位于啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化一般會(huì)抑制轉(zhuǎn)錄；細(xì)胞凋亡等調(diào)控機(jī)制的研究。
【服務(wù)內(nèi)容】
根據(jù)待測(cè)基因序列設(shè)計(jì)相應(yīng)引物；基因組DNA的提取和質(zhì)量檢測(cè)；亞硫酸氫鈉修飾基因組DNA；修飾后DNA純化回收；根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求進(jìn)行BSP或者qMSP實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以及向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
【客戶須知及標(biāo)本要求】
（1）組織樣品：新鮮組織放入液氮或-80度保存，組織不少于100mg；
（2）培養(yǎng)細(xì)胞：通過細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2×106個(gè)細(xì)胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，混勻后保存于冰箱（-80℃，避免反復(fù)凍融）；
（3）血液細(xì)胞標(biāo)本：以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，保存（-80℃可長期保存，避免反復(fù)凍融）；
（4）血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本：離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可長期保存，避免反復(fù)凍融）；
（5）樣本運(yùn)輸：可選擇以下任何一種方式寄送標(biāo)本
組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后，加冰袋寄送；
細(xì)胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶（密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（運(yùn)送視路程遠(yuǎn)近2-3天可到達(dá)）。
