科研喜訊：呼吸道病原體核酸檢測(cè)產(chǎn)品助力何賢紀(jì)念醫(yī)院兒科發(fā)表有關(guān)兒童肺炎支原體感染研究成果
2023-03-28 閱讀數(shù)：3727
近日，廣州番禺何賢紀(jì)念醫(yī)院與廣東省婦幼保健院合作研究的一篇研究性論文“Poor accuracy of single serological IgM tests in children with suspected acute Mycoplasma pneumoniae infection in Guangzhou, China”在雜志《Journal of Medical Microbiology》（SCI最新影響因子 3.196）的2023年3月15日刊上得到發(fā)表，文章解決了兒科醫(yī)生經(jīng)常碰到的一個(gè)困惑：呼吸道感染抗體MP-IgM常檢出肺炎支原體陽(yáng)性，但是核酸檢測(cè)MP為陰性；特別是這樣的患兒使用阿奇霉素治療后還有效，那么是不是MP核酸檢測(cè)漏檢了呢？
# 兒童肺炎支原體感染 #
肺炎支原體（MP）是引起兒童社區(qū)獲得性肺炎（CAP）的重要病原體，約占兒童肺炎病例的8%。MP可導(dǎo)致6歲以下兒童的嚴(yán)重肺炎，嚴(yán)重病例甚至需要轉(zhuǎn)移至兒科重癥監(jiān)護(hù)病房。臨床檢測(cè)MP的方法包括培養(yǎng)法、血清學(xué)法和分子生物學(xué)法等。然而，培養(yǎng)法在臨床診斷上作用較局限，因其耗時(shí)較長(zhǎng)且靈敏度較低。血清學(xué)和分子生物學(xué)檢測(cè)方法在臨床實(shí)踐中則各有優(yōu)勢(shì)。血清學(xué)法診斷急性MP感染時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)的流程是以兩次MP-IgM抗體檢測(cè)（急性期和恢復(fù)期）且MP-IgM抗體滴度出現(xiàn)4倍增長(zhǎng)時(shí)，認(rèn)為是MP感染的依據(jù)。雖然MP-IgM可比MP-IgG早兩周產(chǎn)生，在感染急性期更有診斷價(jià)值，但MP-IgM也存在檢測(cè)窗口期，即可能在MP感染后7-10天內(nèi)才產(chǎn)生，導(dǎo)致單次MP-IgM檢測(cè)并不能很好地在早期判斷患者是否存在MP感染。那么單次MP-IgM檢測(cè)的準(zhǔn)確度到底是多少呢？本研究以肺泡灌洗液中的MP-DNA檢測(cè)為金標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判斷這個(gè)問(wèn)題。
#MP感染急性期MP-DNA與MP-IgM的檢測(cè)對(duì)比 #
樣本于2019年MP感染高發(fā)的一年中收集，入組了144位臨床癥狀表現(xiàn)為支氣管肺炎并入院治療的患兒，每名患兒收集到了1份肺泡灌洗液和對(duì)應(yīng)的血清，有的患兒還收集了急性期和恢復(fù)期2份血清，故一共收集了144份肺泡灌洗液與199份血清，當(dāng)中有46名患兒是經(jīng)過(guò)兩次（間隔≥2天）血清采集。急性入院時(shí)檢測(cè)MP-IgM滴度≥1：160則判斷為單次血清檢測(cè)的MP感染陽(yáng)性指標(biāo)。利用懸浮微珠液相芯片多重呼吸道病原體核酸檢測(cè)技術(shù)對(duì)所有的144份肺泡灌洗液樣品進(jìn)行MP-DNA檢測(cè)，以評(píng)估血清MP-IgM抗體檢測(cè)的可靠性。
研究得出了如下結(jié)論：
1、MP-IgM只在急性感染期做單次檢測(cè)，滴度為陰性、1:160、1:320、>1:320時(shí)，肺泡灌洗液中的MP-DNA陽(yáng)性率分別為58%、55%、57%、62%，說(shuō)明單次MP-IgM檢測(cè)為陰性，但實(shí)際58%仍然存在MP感染，這可能與抗體產(chǎn)生存在窗口期有關(guān)；而單次MP-IgM為陽(yáng)性，但實(shí)際上約一半并沒(méi)有MP感染，推測(cè)是當(dāng)時(shí)我國(guó)處于MP感染的高發(fā)期，上次感染后產(chǎn)生的MP-IgM在體內(nèi)殘余所導(dǎo)致。同時(shí)，MP-IgM單次檢測(cè)敏感性為85.5%，特異性僅為25.6%，這就是為什么臨床經(jīng)常碰到IgM抗體為陽(yáng)性，但核酸檢測(cè)為陰性的原因；
2、在急性期和恢復(fù)期都檢測(cè)了MP-IgM時(shí)，以MP-IgM滴度上升4倍作為MP感染的標(biāo)志，則與肺泡灌洗液MP-DNA檢測(cè)達(dá)到100%一致；
3、有MP感染癥狀，但肺泡灌洗液中沒(méi)有檢出MP-DNA的患者，懸浮微珠液相芯片多重呼吸道病原體核酸技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)了其他的病原體感染，包括1例鼻病毒、1例呼吸道合胞病毒、2例卡他莫拉菌、5例肺炎鏈球菌、1例流感嗜血桿菌、2例百日咳，而這些病原體感染后引起的臨床癥狀和MP感染非常類(lèi)似，使得臨床不容易根據(jù)臨床癥狀來(lái)判斷是什么病原體感染，這也是多重病原體核酸檢測(cè)的技術(shù)優(yōu)勢(shì)；
4、為什么使用大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物治療那些實(shí)際并非MP感染的患兒也能起效？這與該類(lèi)藥物具有免疫調(diào)節(jié)的功能有關(guān)，并不是這些藥物真正殺滅或者抑制了MP，而是阿奇霉素調(diào)節(jié)了患兒的免疫功能，使得非MP感染的患兒臨床癥狀也得到了緩解。
# 小結(jié) #
研究主要指出了急性感染期單次的MP-IgM抗體血清學(xué)檢測(cè)不能滿足臨床早期診斷的需求，尤其在MP感染高發(fā)的地區(qū)，由于MP抗體殘留的原因單次MP-IgM檢測(cè)特異性低，出現(xiàn)較多的假陽(yáng)性。但若檢測(cè)急性感染期和恢復(fù)期的MP-IgM濃度升高變化（即使兩次血清IgM檢測(cè)間隔縮短到2天也是有效的），MP-IgM才能準(zhǔn)確診斷MP感染。
該研究使用了廣州華銀醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心提供的懸浮微珠液相芯片多重呼吸道病原體檢測(cè)技術(shù)，本文作者在文章末尾對(duì)我中心表示了感謝。
# 華銀康呼吸道病原體核酸檢測(cè)系列產(chǎn)品 #
廣州華銀醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心研發(fā)了基于懸浮微珠液相芯片技術(shù)的多重呼吸道病原體核酸檢測(cè)系列產(chǎn)品，該產(chǎn)品取樣方便，咽拭子、肺泡灌洗液和痰液等標(biāo)本均可送檢。技術(shù)方面，我們結(jié)合了多重PCR特異性擴(kuò)增技術(shù)與Luminex懸浮微珠液相芯片技術(shù)平臺(tái)，可以快速、準(zhǔn)確地檢出組合內(nèi)呼吸道感染的常見(jiàn)病原體，可靠性經(jīng)過(guò)了多次驗(yàn)證。近幾年，僅在廣東地區(qū)檢測(cè)標(biāo)本量就超過(guò)了20萬(wàn)，得到了廣大臨床的認(rèn)可，為臨床呼吸道感染的早期診斷提供了幫助！在解決精確判斷感染病原體種類(lèi)以便實(shí)施精準(zhǔn)治療的臨床問(wèn)題過(guò)程中，由于其技術(shù)含量較高，在解決臨床問(wèn)題的同時(shí)，還能產(chǎn)生優(yōu)秀的科研成果！
未來(lái)，我們會(huì)繼續(xù)致力于不斷研發(fā)新的分子診斷產(chǎn)品，旨在更好的滿足臨床的需求，提供保質(zhì)保量的檢驗(yàn)服務(wù)！
